Даниил Викторович, есть ли альтернативные методы определения генерации активных форм кислорода в клетках? Почему был выбран именно вариант с использованием наноэлектрода? И почему для разных тестов использовались разные клеточные линии? Определялась ли цитотоксичность bodipy, не увеличит ли наличие центрального иона бора темновую цитотоксичность? В каком растворителе зарегистрированы спектры поглощения полученных bodipy, каково будет их поведение в водных средах (стабильность к гидролизу, агрегация)?
Существуют и альтернативные методы детекции активных форм кислорода (АФК), например флуоресцентные метки [Inorg. Chem. 2019, 58, 6507−6516][Chem 5, 3151–3165, December 12, 2019]. В нашей работе мы использовали наноэлектрод для детекции АФК в реальном времени для демонстрации того, что АФК образуются внутриклеточно именно при облучении светом 460 нм. В дальнейшем планируется ряд экспериментов по определению цитотоксичности Рибоплатина на более широком ряде клеточных линий, включая MCF-7.
На данном этапе цитотоксичность bodipy не определялась, однако в литературе определялась цитотоксичность других производных bodipy [Inorg. Chem. 2020, 59, 11823−11833] и синтезированное в данной работе производное не показало значительной цитотоксичности как при темновой инкубации, так и при инкубации с облучением.
Спектр поглощения был зарегистрирован в метаноле чтобы исключить возможные проблемы с растворимостью производных bodipy. Стабильность пролекарств платины(IV), имеющих в своём составе синтезированные производные bodipy будет определяться в темноте в физиологических условиях (буферный раствор, 37оС) и в присутствии восстановителя (аскорбат натрия), для определения склонности целевых пролекарств платины(IV) к неселективному распаду и восстановлению в отсутствие облучения.
Для определения внутриклеточного накопления и распределения платины использовался метод ICP-MS с предварительной пробоподготовкой образцов клеток по стандартному протоколу.
Даниил Викторович, есть ли альтернативные методы определения генерации активных форм кислорода в клетках? Почему был выбран именно вариант с использованием наноэлектрода? И почему для разных тестов использовались разные клеточные линии?
Определялась ли цитотоксичность bodipy, не увеличит ли наличие центрального иона бора темновую цитотоксичность? В каком растворителе зарегистрированы спектры поглощения полученных bodipy, каково будет их поведение в водных средах (стабильность к гидролизу, агрегация)?
Татьяна Валентиновна, большое спасибо за вопрос.
Существуют и альтернативные методы детекции активных форм кислорода (АФК), например флуоресцентные метки [Inorg. Chem. 2019, 58, 6507−6516][Chem 5, 3151–3165, December 12, 2019]. В нашей работе мы использовали наноэлектрод для детекции АФК в реальном времени для демонстрации того, что АФК образуются внутриклеточно именно при облучении светом 460 нм. В дальнейшем планируется ряд экспериментов по определению цитотоксичности Рибоплатина на более широком ряде клеточных линий, включая MCF-7.
На данном этапе цитотоксичность bodipy не определялась, однако в литературе определялась цитотоксичность других производных bodipy [Inorg. Chem. 2020, 59, 11823−11833] и синтезированное в данной работе производное не показало значительной цитотоксичности как при темновой инкубации, так и при инкубации с облучением.
Спектр поглощения был зарегистрирован в метаноле чтобы исключить возможные проблемы с растворимостью производных bodipy. Стабильность пролекарств платины(IV), имеющих в своём составе синтезированные производные bodipy будет определяться в темноте в физиологических условиях (буферный раствор, 37оС) и в присутствии восстановителя (аскорбат натрия), для определения склонности целевых пролекарств платины(IV) к неселективному распаду и восстановлению в отсутствие облучения.
Спасибо за ответ!
Даниил Викторович, какой медод использовался для изучения накопления и распределения ваших соединений в клетке?
Алексей Анатольевич, большое спасибо за вопрос.
Для определения внутриклеточного накопления и распределения платины использовался метод ICP-MS с предварительной пробоподготовкой образцов клеток по стандартному протоколу.